定制抗体服务——噬菌体展示技术服务

为什么要定制抗体自主生产抗体,为降低成本并清楚了解抗体特征而开发;自主开发抗体,应用于更多具有标记细胞、调控细胞功能的研究领域突变特异性蛋白的免疫组织化学检测;单细胞级胞内抗原检测;抗原特异性pMHC复合检测;抗原特异性T细胞克隆检测。对于免疫调节性靶点,开发具有治疗价值的抗体

抗体开发技术类型抗体与抗原结合于抗体可变区,该部分由抗体重链和轻链基因可变区部分编码。B细胞分泌的抗原特异性抗体均为配对的重链可变区和轻链可变区。因此,抗体开发过程中,根据抗体基因的重链和轻链的配对模式,可以分为两种技术:组合性技术,即抗体的重链和轻链通过随机配对形成抗体可变区。由于存在重链和轻链的随机配对,所以抗体基因的多样性极其丰富,该技术的代表方法是:噬菌体展示文库、酵母展示文库、哺乳动物展示文库非组合性技术,即抗体的重链和轻链的配对是真实存在于B细胞克隆中的,该方法形成的抗体多样性不如组合性技术丰富,但是这些抗体基因已经过免疫机制的天然筛选,其抗体亲和性和稳定性更好。该技术的代表方法是:杂交瘤技术、单B细胞克隆性扩增技术、单B细胞抗体基因测序技术我们曾介绍了自主开发的非组合性抗体开发技术ICB单B细胞抗体基因测序,本文将介绍组合性抗体开发技术噬菌体展示文库技术。

噬菌体展示技术噬菌体展示技术(phage displaytechnology)是将抗体可变区DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使抗体随外壳蛋白的表达而表达,具体原理如下:通过收集免疫动物脾细胞或PBMC的B细胞,提取总RNA,RT-PCR获得带有酶切位点的目的序列;将抗体基因以双链形式定向整合至噬菌粒载体系统中,化学转化或电转等方式转入感受态宿主细胞中,抗体蛋白以融合蛋白的形式表达于噬菌体。由于抗原免疫动物后,获得的免疫球蛋白重链和轻链随机匹配将获得10的10次方(库容)种,通过噬菌体展示获得的抗体蛋白只有真正和抗原结合,才能达到建库的目的。通过抗原抗体的亲和力互作,筛选出与目标抗原结合的高亲和力抗体是噬菌体筛选抗体的关键步骤。筛选方法主要包括:固相筛选法:通过包被在酶标板或其他固相介质上的抗原富集具有高亲和性的噬菌体。然后经3-5个循环的“结合-洗脱-富集”得到目的噬菌体,可直接用于后续高通量测序及蛋白测序。液相筛选法:即将生物素修饰的抗原包被在与亲和素偶联结合的磁珠或琼脂糖上,进行抗原特异性结合的方法。然后通过多次筛选,得到高亲和力的噬菌体。

合肥科生景肽生物科技有限公司成立于2018年,目前已经打造了全球领先的以肽为核心的生命分子发现、合成生产、结构优化、递送平台,主要瞄准肽发现及靶向递送,专注于为各大制药企业、生物技术公司、科研单位提供一站式的定制化研发服务。 公司独有的KPDS™平台(KS-V Peptide Discovery Services Platform)是国际领先的的多肽药物发现平台,我们致力于创新药物的高效和精准开发,以科生景肽专有KPDS技术为核心,提供一站式,定制化的多肽发现服务,以灵活的产品形式和服务模式助力广大客户各类药物发现项目的快速推进和应用探究,包括但并不限于疾病诊断及保健功能产品、多肽药物、核素偶联药物(RDC)、基于小分子的肽药物偶联物(PDC)和多功能肽偶联物等。
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