多肽合成步骤及原理-Hypeptide

合生生物多肽合成，示范多肽片段：KALKALKKALKALK 15mg 95%

1. 根据理论合生生物计算值称取0.5g（取代度0.3）二氯树脂于30 ml的反应器中，用50ml的DCM浸泡30min,DMF洗涤3次。

2 合生生物称取片段第一个氨基酸Fmoc-Lys(Boc)-OH 150mg ，加入DCM将其溶解，然后加入0.2ml的DIEA反应1.5-2h。

3. 2小时后，用甲醇溶液封头（甲醇：DIEA : DCM=1：1：2)半小时，然后用DMF洗涤四次，抽干待用。

4. 合生生物向反应器中加入适量的20%哌啶溶液（哌啶/DMF=1:4），反应20 min，以此来脱去Fmoc保护基团。脱完保护后用DMF洗涤四次，然后抽干。

5. 合生生物取少量树脂用茚三酮法检测，树脂有颜色，则脱保护成功。

6. 合生生物称取片段的C端第二个氨基酸Fmoc-Ala-OH 0.45mmol (第一个氨基酸摩尔量的3倍）和0.45mmol HOBT，加入少量（刚好没过树脂）DMF将其溶解，然后合生生物加入0.2 ml的DIC到反应器中。

7. 半小时后，合生生物取少量树脂检测，用茚三酮法检测，若树脂有颜色，则缩合不完全,继续反应；若树脂为无色，则反应完全。

8. 待反应完全后，合生生物用DMF洗涤树脂四次，然后抽干，向反应器中加入一定量的20%哌啶（哌啶/DMF=1:4），合生生物脱去树脂上的Fmoc保护基团。脱完保护后用DMF洗涤四次，合生生物然后抽干。

9. 合生生物取少量树脂用茚三酮法检测，树脂有颜色，说明脱保护成功。

10. 合生生物按照步骤7-10依次接上片段1的剩余氨基酸

11. 脱去片段1最后一个氨基酸N端的Fmoc保护。

12.切割：合生生物称量反应后的树脂加入10倍体积的切割液，反应1.5-2h（切割液：95%TFA+2%EDT+2%Tis+1%H2O），滤掉树脂，加入4-5倍体积的乙醚离心，去掉上清液，合生生物再用乙醚洗涤三次。

13.合生生物通过高效液相色谱仪器（HPLC）将目标肽段与杂质分离，合生生物将目标肽段冻干成粉末，并送合生生物QC质检

14.QC检测纯度（HPLC）,分子量（MS）均合格后，产品包装发货。

具体工艺在上图所述

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合肥科生景肽生物科技有限公司成立于2018年，目前已经打造了全球领先的以肽为核心的生命分子发现、合成生产、结构优化、递送平台，主要瞄准肽发现及靶向递送，专注于为各大制药企业、生物技术公司、科研单位提供一站式的定制化研发服务。公司独有的KPDS™平台(KS-V Peptide Discovery Services Platform)是国际领先的的多肽药物发现平台，我们致力于创新药物的高效和精准开发，以科生景肽专有KPDS技术为核心，提供一站式，定制化的多肽发现服务，以灵活的产品形式和服务模式助力广大客户各类药物发现项目的快速推进和应用探究，包括但并不限于疾病诊断及保健功能产品、多肽药物、核素偶联药物(RDC)、基于小分子的肽药物偶联物（PDC)和多功能肽偶联物等。
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