多肽合成 caspase-8 的底物:Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA|(219138-21-3)

Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA 是 caspase-8 的底物。Caspase-8 结合并裂解Ile-Glu-Thr-Asp (IETD) 肽序列,释放对硝基苯胺,可通过 405 nm 处的比色检测来定量检测酶活性。

英文名称:Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA

CAS号:219138-21-3

分子式:C27H38N6O12

分子量:638.62

纯度:≥95% or 98%

货期:现货

性状:白色固体粉末

储存条件:-20℃

序列缩写:Ac-IETD-pNA

H2O 中的溶解度 : 0.98 mg/mL (1.53 mM; adjust pH to 12 with 1 M NaOH)

Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA(乙酰基-异亮氨酸-谷氨酸-苏氨酸-天冬氨酸-对硝基苯胺)是一种专门设计的底物,用于检测和研究caspase-8酶的活性。Caspase-8,作为半胱天冬酶(caspase)家族的一员,在细胞凋亡过程中扮演着至关重要的角色。细胞凋亡,或称程序性细胞死亡,是维持机体稳态、清除受损或多余细胞的一种自然机制。Caspase-8的活性状态对于调控这一过程至关重要,因此,开发准确、灵敏的检测方法对于理解细胞凋亡机制及疾病治疗具有重要意义。

Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA这一底物的设计巧妙之处在于其包含了caspase-8特异性识别的氨基酸序列Ile-Glu-Thr-Asp(IETD)。当caspase-8酶与底物结合时,它会精确地在其特异性识别序列的天冬氨酸(Asp)残基后进行切割,从而释放出对硝基苯胺(pNA)部分。对硝基苯胺是一种具有明显颜色的化合物,在405纳米(nm)波长光下的吸光度变化可以被用来定量检测caspase-8的酶活性。这种基于比色的检测方法不仅简便快捷,而且具有较高的灵敏度和特异性,使得科研人员在体外实验中能够轻松监测caspase-8的活性水平。

在实际应用中,科研人员通常会将Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA底物与待测样本(如细胞提取物、组织匀浆或生物流体)混合,并在一定条件下孵育,使caspase-8有机会与底物结合并发生切割反应。随后,通过测定反应体系中pNA的释放量(通常通过比色法,在405nm处检测吸光度变化),即可间接计算出caspase-8的酶活性。这种方法不仅适用于基础科学研究,帮助揭示细胞凋亡的分子机制,还可用于药物筛选和疾病诊断,评估潜在药物对caspase-8活性的影响,以及监测疾病进程中细胞凋亡状态的变化。

值得注意的是,虽然Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA底物及其检测方法在caspase-8活性评估中表现出色,但实际操作时仍需注意控制实验条件,如温度、pH值以及底物与酶的比例等,以确保结果的准确性和可靠性。此外,随着技术的不断进步,新的检测方法(如荧光共振能量转移技术、电化学检测等)也在不断发展,为更精准、高效地评估caspase-8活性提供了更多选择。总之,Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-pNA底物及其基于比色的检测方法在细胞凋亡研究和相关疾病诊断中发挥着重要作用,为深入理解细胞死亡机制及开发新型治疗策略提供了有力工具。

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