人参皂苷Rg3抑制HCE8693细胞生长并诱导细胞凋亡作用的实验研究-Hypeptide

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本文是吴彤、魏坤共同发表在《中国中医药科技》杂志上的文章。本研究将人参提取成分20(R)-人参皂苷Rg3应用于人大肠癌细胞株HCE8693，探讨传统中药对肿瘤治疗的部分机制。研究表明，一定浓度的人参皂苷Rg3能有效抑制HCE8693的生长，人参皂苷对HCE8693的生长抑制及促凋亡作用有浓度依赖性。

实验方法

细胞生长抑制作用(MTT法)

HCE8693细胞以每孔5×103个细胞接种于96孔培养板中，24h后分别加入1% Rg3 10μl(Rg3终浓度为0.05%，R10组)、1% Rg3 5μl(Rg3终浓度为0.025%，R5组)、Rg3 3μl(Rg3终浓度为0.017%，R3组)、Rg3 2μl(Rg3终浓度为0.01%，R2组)，每组均设3个复孔，培养5天后进行MTT比色试验。与试验孔平行设不加细胞只加培养液的空白对照孔，其他试验步骤保持一致，最后比色时以空白孔调零。生长抑制率=(1-试验组吸光值/对照组吸光值)×100%。

流式细胞仪(FCM)分析

含5×104HCE8693细胞培养于6孔板，24h后按MOI值2000加各组Rg3，共作用5天，于第5天收集细胞，分析凋亡细胞百分率。

统计分析

结果以均数±标准差表示，不同组间结果采用t检验，由SPSS11.0统计学软件包进行分析。

结果

人参皂苷Rg3作用于HCE8693细胞后的形态变化

Rg3作用于HCE8693细胞后，于1～3天开始出现细胞变圆，突起减少，胞浆中有空泡产生，4～5天后细胞悬浮。在1% Rg3 10μl和1% Rg3 5μl组中，上述形态学改变更为明显。见图1～2。

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Rg3对HCE8693细胞生长的抑制作用

用MTT法显示第5天各组HCE8693细胞生长抑制率比较如表1。其中各组与PBS对照组(吸光值0.015；生长抑制率0%)比较均有差异，R3和R2、R10和R5组间比较无统计学差异，R3、R2组与R10、R5组比较有统计学差异，且抑制率以R10组为最高，说明随浓度增高Rg3对HCE8693细胞的生长抑制作用亦随之增加。

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Rg3对HCE8693细胞的凋亡诱导作用

各组HCE8693细胞凋亡率如表2。其中各组与PBS对照组(凋亡率4.3%)比较均有差异，R3和R2、R10和R5组间比较无统计学差异，R3、R2组与R10、R5组比较有统计学差异，且凋亡率以R10组为最高，说明随浓度增高Rg3对HCE8693细胞的促凋亡作用亦随之增加。

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结论

人参皂苷Rg3对HCE8693有生长抑制作用及促凋亡作用，但其生长抑制率和凋亡率与药物浓度呈正比。本实验中Rg3抑制机制问题，我们推测，可能与其促进肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的合成，使肿瘤细胞增殖速度减慢有关。

文献来源：中国中医药科技2006年3月第13卷第2期

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